蒙娜麗莎作為達芬奇一張經典的傳世名畫，在全世界範圍內都掀起了廣泛的議論，他自誕生之日起，漫長的500多年時間裡面，無數的人都對這幅畫痴迷不已，甚至在20世紀初的時候，還有人偷竊了這幅畫長達兩年之久，並最終仍然送回到了原位，由此可見這幅世界名畫的獨特魅力，不過要說起來，人們還是十分關注蒙娜麗莎所蘊含的秘密。
也不知道是否是後人牽強附會，在蒙娜麗莎上有數不清的謎團，直到今天也難以完全揭秘，達芬奇作為作者本人，他在各個領域上都看成是絕無僅有的天才，從繪畫到建築，從數學到物理，因此在他的畫作之中，都包含了達芬奇本人對數學，對各種美學領域的見解，成為後人永遠的財富。
回到蒙娜麗莎這幅畫像上，有關畫像上人物的身份曾經一度引發猜想，有人認為，她應該是達芬奇父親朋友的妻子，一個有五個孩子的家庭婦女，達芬奇用獨特的手法，展現出來一位在資本主義上升時期城市中產階級婦女的代表，當然關於畫像女主人身份的猜想，也有不同的版本流傳出來，但就在對原畫研究的過程中，一些專家驚奇地發現，蒙娜麗莎竟然是一副有四張畫疊在一起形成的。
法國的一位科學家利用光反射的原理，發現了蒙娜麗莎畫像之中掩藏的秘密，尤其是在當中找到一副女性肖像畫，因此他認為這才是蒙娜麗莎的“真面貌”。他所利用的工具，是自己發明的240兆畫素的“多光譜”攝影機，這種攝像機能夠根據影象所折射出來的光鮮，將整張畫作分層整理出不同的樣板，最終按照精密的資料分析，蒙娜麗莎畫作形成了1640幀影象。
隨後10年的時間裡面針對這些影象做逐一對比的時候發現，蒙娜麗莎其中所蘊含的竟然是4幅畫作，第一層是達芬奇對未知人物的肖像草圖，這一點善於繪畫的人根本都不陌生，而第二層則有有些不同，畫像上現實是一個佩戴了珍珠發誓的肖像畫，第二層直接覆蓋在第一層的原稿上，而第三層仍然又是一個女子的畫像，考證下來應該是達芬奇才1503年左右畫成的，名為《麗莎·格拉迪尼肖像》。
因此這個科學家認為，第三層畫像上 這個女子才是蒙娜麗莎的真容，而第三層和第四層的區別在於，畫像中女子所注視的方向不同，而整個蒙娜麗莎創作的時間跨度，長達三年，是達芬奇在業餘時間進行繪畫和創作完成的作品。