流式細胞術（Flow Cytometry ，FCM）是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒逐個進行快速定量分析和分選的技術。
一、小妖精的成仙之路
二、樣本型別
流式細胞儀可檢測多種樣本：外周血、骨髓、細胞穿刺液、洗脫液、實體組織、培養細胞、微生物。
三、工作原理
流式細胞儀主要由3部分組成：液流系統、光學系統、電子系統。進行熒光染色後的待測細胞會在一定氣體壓力下被壓入流動室，在鞘液的包裹下待測細胞呈單行排列，依次透過檢測區域，被熒光染色的細胞在鐳射束的照射下會產生散射光和激發熒光。這兩種訊號會同時被光電倍增管（ PMT） 接收。接收後可轉換為電訊號，再透過模/數轉換器，將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數字訊號。
四、流式細胞術的應用
五、操作過程中的注意點
1、上機前處理
小心熒光淬滅
操作時必須嚴格按照孵育時間，如果抗體孵育時間過長，熒光是會逐漸淬滅的。那如果不得不推遲實驗怎麼辦？可以把試管放在冰裡面，這樣會稍稍延長淬滅的時間。
注意染色順序
在進行多熒光染色的時候，相同的細胞會因為染色順序不同而導致熒光強度的差異。解決辦法為：預實驗。做一系列的不同染色順序的樣本，透過對染色前和染色後的各種樣本進行比較分析，判斷染色順序對細胞造成的影響。
選好染色方案
染色方案不合理也可能會導致熒光染色訊號太弱。解決的方案：預實驗。在正式開始實驗之前，透過預實驗，設計出一個完美的染色方案。（考慮試劑種類，試劑質量，試劑用量，孵育時間，洗滌次數，染料濃度，染色時間及染色溫度等其他因素。）
做好陰性對照及同型對照試驗
細胞陰性對照可以顯示細胞基準的熒光水平。
同型對照則是為了檢視抗體非特異性結合的水平。選擇同型對照需要注意採用相同物種、相同亞類、相同染料、相同濃度，否則，檢測的時候會出現亂七八糟的同型對照結果。
選擇合適的抗體
通用原則是：為表達最弱的抗原選擇染色指數最高的熒光素。根據使用的流式細胞儀效能、鐳射器、濾光片種類來選擇。對於多色實驗，需選擇發射光譜重疊小的染料。
2、引數設定
資料的獲取必須是在儀器效能的校準均合格的基礎上進行。儀器散射光和熒光訊號的光電倍增管電壓、增益、顏色補償等引數的設定會直接影響結果。
電壓
電壓的調節需根據陰性對照管來調節。
閾值
可以以任意引數及多個引數的組合作為閾值；大多數樣本都可以設定FSC/SSC；閾值以下的訊號不儲存；可以根據陰性對照管來調節。
目的是將不需要的雜質訊號，噪音訊號，無用的細胞訊號等扣除，使收集到的都是有用訊號。
補償
流式細胞分析中經常要用到2種以上的熒游標記抗體進行染色，而目前所使用的多種熒光染料發射譜間有一定重疊。熒光補償則可以從探測器種除去匹配熒光以外的任何熒光訊號。
補償方式：任意兩個通道之間都可以調節。
補償的調節：根據單染對照管來調節。
流式細胞術是一門已經很普及的細胞檢測分選技術，但很多人知其然不知其所以然。
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