AbMole精研抑制劑十年，最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是：磷脂酶D1-mTOR軸在肝纖維化中的體外作用。
肝星狀細胞（HSC）的啟用在肝纖維化程序中起著核心作用。磷脂酶D（PLD）酶參與多種細胞活動。但是，PLD是否以及如何調節HSC的啟用仍不清楚。透過Western印跡和免疫組化測定CCl4誘導的小鼠肝纖維化模型中肝內PLD1和PLD2的表達。使用重組轉化生長因子β1（TGFβ1）處理的大鼠HSCs系（HSC-T6）構建肝纖維化的細胞模型。在增殖，促成纖維細胞標誌物的表達和遷移方面評估了纖維發生。使用小分子PLD1抑制劑，PLD1-SiRNA，雷帕黴素（mTOR抑制劑）和MHY1485（mTOR啟用劑）處理的HSC-T6評估了PLD1-mTOR軸介導的TGFβ1誘導的纖維形成的作用。與正常肝組織相比，在CCl4引起的肝硬化中，PLD1顯著增加，而PLD2不明顯。PLD抑制劑抑制PLD1活性或HSC-T6中PLD1表達下調可顯著抑制TGFβ1誘導的纖維化，這表現為細胞增殖減少和促纖維化標誌物表達降低。此外，無論是PLD1抑制劑還是PLD1-SiRNA均可顯著抑制HSC-T6的mTOR活性。此外，PLD1抑制劑不僅在雷帕黴素的TGFβ1誘導的纖維形成中表現出相似的作用，而且鈍化的MHY1485增強了HSC-T6的細胞增殖。 HSC的PLD1-mTOR軸可在晚期肝纖維化中進行治療靶向。
MHY1485（AbMole，M9050，純度 99。33%）是一種mTOR啟用劑，透過抑制自噬體和溶酶體之間的融合，有效抑制自噬。在本研究中用於處理細胞。在存在或不存在PLD1抑制劑或SiRNA寡核苷酸的情況下，用MHY1485（5μM，mTOR啟用劑，Abmole）處理每孔總計1×104 HSC-T6 48小時。
Fig。 5。 Activation of PLD1-mTOR axis enhanced TGFβ1-induced fibrogenesis in HSC-T6。
結果表明，在存在或不存在TGFβ1的情況下，MHY1485並不直接透過HSC-T6調節a-SMA /膠原I的表達。MHY1485增強的增殖也可能被PLD1抑制劑抑制，雷帕黴素和MHY1485不調節促纖維化標記物的表達。
鳴謝：Yizhong Chang， et al。 Life Sci。 2020 Jun 15；251：117595。