果膠酶檢測試劑盒（DNS微板法）
產品貨號：
BA1545
產品規格：
100T
產品簡介：
天然果膠類物質以原果膠、果膠
（Pectin）
、果膠酸的形態廣泛存在於植物的果實、根、莖、葉中，是細胞壁的一種組成成分，它們伴隨纖維素而存在，構成相鄰細胞中間層粘結物，使植物組織細胞緊緊黏結在一起。果膠酶
（Pectinase）
是一類分解果膠質酶類的總稱，實質是多聚半乳糖醛酸水解酶，包括原果膠酶，果膠酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類，廣泛存在於植物果實和微生物中，主要用於食品、釀酒、環保、醫藥、紡織及日化用品行業。
果膠酶檢測試劑盒
（DNS
微板法
）
檢測原理是果膠酶水解果膠生成β
-
半乳糖醛酸，透過二硝基水楊酸
（DNS）
與反應形成紫紅色的化合物，該化合物呈色強度與半乳糖醛酸濃度成正比，於酶標儀測定吸光度，透過與標準曲線比較，計算出樣品中果膠酶活性。該試劑盒主要用於定量檢測植物組織或果實中果膠酶，反應顏色越深，吸光度越大，果膠酶的活性越強。該
100T
試劑盒可以檢測約
95-98
次樣本。該試盒僅用於科研領域，不宜用於臨床診斷或其他用途。
產品組成
：
自備材料：
1。
蒸餾水
2。
實驗材料：桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織
3。
研缽或勻漿器
4。
離心管或試管
5。
離心機
6。
水浴鍋
7。 96
孔板
8。
酶標儀
操作步驟：
1。
果膠酶提取：取果實或其他植物組織，洗淨，擦乾，稱取剪碎的新鮮樣品，置於提前
4℃
預冷的研缽或勻漿器，加入預冷的
Pectinase
Lysis buffer
，充分研磨或勻漿後轉入離心管或試管，離心。留取上清液，即為果膠酶提取液，儲存待用。
2。
稀釋果膠標準溶液：取適量的果膠標準
（1mg/ml）
，按下表進行稀釋：
3。
加樣：按照下表設定空白管、標準管、對照管、測定管，溶液應按照順序依次加入，並注意避免產生氣泡，小心混勻。如果樣品中的果膠酶活性過高，可以減少樣品用量或適當稀釋後再進行測定。樣品的檢測最好能設定平行管，求平均值。
4。
測定：沸水浴，自來水中將離心管或試管冷卻至室溫，以蒸餾水稀釋，混勻。取上述空白管、標準管、測定管中溶液，加至
96
孔板的孔中，用酶標儀以空白調零，測定系列標準孔、對照孔、測定孔在吸光度。
計算：
以
1-5
號管系列果膠標準
（4
、
8
、
12
、
16
、
20μg）
為橫座標，以對應的吸光度為縱座標，繪製標準曲線，直接計算直線迴歸方程。以測定孔吸光度減去對照孔吸光度的差值作為測定吸光度值
（A
測定
）
，帶入迴歸方程求得的定管果膠酶含量，根據下述公式計算其活性：
組織樣品的果膠酶活性（
μ
g/hg
）
=
（
m
×
v
）
/
（
W
×
t
×
V
S
）
式中：
m=
根據標準曲線求得的測定管果膠酶含量（μ
g
）
V=
果膠酶提取液總體積（
ml
）
W=
樣品鮮重（
g
）
t=37
℃水浴時間（
h
）
=1
V
S
=
測定時所取果膠酶提取液的體積（
ml
）
=0。2
液體樣品的果膠酶活性
（μg/h·ml）=m×N/V
式中：
m=
根據標準曲線求得的測定管果膠酶含量
（μg）
N=
稀釋倍數
V=
測定時所取果膠酶提取液的體積
（ml）=0。2
注意事項：
1。
取樣量、試劑用量應根據果膠含量適當調整。
2。
可溶性糖對測定結果有較大影響，應徹底去除樣品中的可溶性糖。
3。
Pectinase
Lysis
buffer
應密閉避光儲存，避免有效成分揮發。
4。
如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但應考慮分光光度計的最小檢測體積。
5。
為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
有效期
：
6
個月有效。
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