發現一篇很好的人體心肌單細胞分離方法，在此與大家分享：動物源性心肌細胞和誘導多能幹細胞（iPSCs）是研究心血管疾病的兩種主要細胞模型，但它們都不能精確模擬成熟心肌細胞對疾病或應激的反應。因此，迫切需要尋找一種最佳化的原代人心肌細胞分離方法，以提供一個真實的細胞模型。
實驗步驟：
1. 運輸和切片
1。1 在50 ml錐形管中加入45 ml預冷心肌保護液（UW）溶液，並將其保持在冰上，以便在手術切除後進行組織運輸。
1。2 從人體心臟組織中去除脂肪和結締組織，並用鋒利的剪刀將其剪斷。在心外膜側塗抹氰基丙烯酸酯，將組織固定在樣本板上，樣本板固定在自動組織切片機。
1。3 用0。3mm/s前進速度和2。5mm振幅的鋼刀片將心臟組織切割成200µm厚的組織切片。切片時，組織應始終浸泡在UW緩衝液中。
2. 心肌細胞分離
2。1 無鈣灌注（9分鐘）
2。1。1 將組織碎片轉移到含有15毫升含氧無鈣溶液的50毫升燒杯中，在室溫下輕輕旋轉。3分鐘後換成新鮮緩衝液，重複兩次。
2。2 酶消化（0。75–1。5小時）
2。2。1 過濾碎片並將其轉移到含有酶緩衝液（275 u/ml膠原酶II和1。2 u/ml蛋白酶XXIV）的50 ml錐形瓶中，並輕輕旋轉瓶中。
2。2。2 一旦上清液變得模糊，丟棄上清液，並在同一緩衝液中培養片段。
2。2。3 丟棄上清液，並在具有相同成分但不含蛋白酶的新鮮酶溶液中重新孵育，必要時可重複。這個步驟會產生大量的桿狀細胞。
2。2。4 用100μm過濾器過濾細胞懸液，將含錐形管的心肌細胞以100×g離心1min，製成顆粒狀心肌細胞。去除上清液，並在1–3 ml（取決於產量）再懸浮緩衝液中重新懸浮顆粒化的心肌細胞。
