為進一步提升病理醫師對組織常見疾病與淋巴瘤的臨床鑑別診斷能力，減少淋巴瘤漏診事件的發生，“
淋理盡知——淋巴瘤基礎診斷
”系列專訪正式起航，醫脈通將邀請多位淋巴瘤病理診斷專家接受採訪，分享不同組織常見病與淋巴瘤鑑別診斷的理論和實踐經驗，以幫助病理醫師提高淋巴瘤綜合診斷能力。本期“淋理盡知”特邀
北京大學第三醫院張燕教授、北京大學第三醫院孟慶陽教授和華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院潘華雄教授
接受採訪，分享臨床檢驗標本處理技術與質量控制相關經驗。
張燕教授：病理技術之從取材到染色
診斷經典語錄：做好交接（易錯）環節質控，做到完全責任到人
（影片較長，建議在WiFi條件下觀看）
醫脈通
標本處理包括前處理、固定、脫水、包埋、切片和染色六大流程，質控是流程間重要的連線點，請您談談如何梳理流程內和流程間的質控。
張燕教授
對於標本處理流程內質控應嚴格遵守操作流程及規範，對於流程間的質控應該注意：
1、組織的前處理與固定：
真空樣本轉移系統
有助於解決夜間難即時固定的問題；在固定流程中，小標本需儘量讓臨床醫師選用
透明瓶並浸泡在固定液
裡。
2、脫水：對於胃腸鏡標本，
6-7個小時的脫水流程
十分必要，如果只進行3個小時脫水，可能由於溫度過高、壓力過大造成組織一部分核酸的丟失從而造成某些分子的處理不當。
3、包埋：由於組織直接暴露在外，無標號狀態，包埋成為日常工作中最易出紕漏的環節，所以包埋的操作規範至關重要，
切忌組織丟失、杜絕張冠李戴
。
4、切片：實行
單張切片負責制
，每個機器旁均配備玻片打號機。
5、染色：染色流程、液體更換和染色機維護保養均是染色的重要環節。
染色機上標號並分類大小標
本
有助於提升工作效率。
醫脈通
您認為標本處理質量控制中有哪些要點環節？
張燕教授
質控的要點環節包括交接環節、不可逆環節、人為因素影響技術質量環節和記錄控制環節。
1、在交接環節中應
利用現代技術手段
減少八個交接轉換環節的交接錯誤，做到
完全責任到人
。
2、在不可逆環節中，對於脫水機的維護保養，應遵循
流程與經驗相結合的SOP
，做好對細節的處理。
3、在人為因素影響技術質量環節實行
重點質控環節單人負責制並進行每日抽檢
，彙總問題並及時處理。
4、對於記錄控制環節，應注意
定期總結並彙總成每月技術質控報告
。
醫脈通
您認為技術質控包含哪些內容，它們之間是否存在關聯？
張燕教授
技術質控包含內部質控、與診斷醫師溝通和進行各類檢查，質控管理是環環相扣的過程管理，需要清晰質控的每一流程的重要性和重點，明確落實責任。（更多內容詳見本期採訪影片）
孟慶陽教授：常規制片流程與注意事項
診斷經典語錄：環環相扣，每一個環節都需要注意
（影片較長，建議在WiFi條件下觀看）
醫脈通
包埋使組織獲得一定硬度和韌度，便於切片，是重要的標本處理環節，能否請您談談包埋的注意事項？
孟慶陽教授
“四防”是包埋過程需要重點注意的4個方面：
防“汙染”：包埋過程中，檯面需保持
乾淨整潔
；每包埋一個蠟塊後需用
酒精燈燒鑷子
。
防“迸濺”：使用鑷子拆包時，對於小組織、穿刺組織等易蹦出的組織，應格外小心。
防“丟失”：開啟盒蓋時
注意盒蓋是否有組織粘連
，並觀察組織數量是否與盒上標記是否一致。
防“張冠李戴”：
勿一次性開啟多個包埋盒
，應開啟一個包埋一個。
其次，對於包埋方向的選擇，應將
組織切面/病變位置朝下包埋
；對於特殊組織（胃腸、面板、管腔等需要觀察層次的組織），應選擇立埋；在位置的選擇上，
組
織應放在模具的中央
，多塊小/長組織應
整齊集中擺放並按平
。
醫脈通
切片是組織塊經過取材、固定、脫水包埋處理後，用切片機制作切片的過程，能否結合您的日常工作經驗談談切片的注意事項。
孟慶陽教授
切片流程中需要重點關注的方面為 “三防”（如上圖），其次應注意“六防”，
防“褶皺”、防“重疊”、防“顫痕”、防“刀痕”、防“裂隙”、防“切面不全”
。
醫脈通
染色使標本能在光學顯微鏡下直接觀察，是常規制片流程中的關鍵環節之一，能否請您談談在染色過程中需要注意的細節。
孟慶陽教授
染色是染料與細胞組織結合的過程，
在脫水透明過程中，透明不佳導致組織結構模糊，
提示換液
。
使用機器染色後，將會取出在
顯微鏡下進行質控，觀察紅藍對比度
，以便及時對蘇木素和伊紅進行調整，保證核漿染色對比鮮明。
封片時膠多應注意調整膠量；膠少時易造成氣泡問題，應注意封片後
及時將打膠針放入二甲苯中浸泡
，封片時將前面的膠液打出後開始。
標本處理流程應注意按照標準化流程操作，進行每一個步驟時多想一步，思考其對下一步是否有影響，環環相扣，每一個環節都需要重視。
潘華雄教授：免疫組化染色質控——病理醫生的作用
診斷經典語錄：醫生免疫組化技術的提升有助於提高診斷的準確度
（影片較長，建議在WiFi條件下觀看）
醫脈通
技術員、試劑廠家、質控中心和病理醫生都是質量控制的參與者，能否請您談談他們在質控中的作用？
潘華雄教授
技術員：可監控外對照，發現高背景和染色不均，但無法發現內對照染色失敗，也無法監控所有指標，對於細微的，例如假陰性、抗原丟失等問題仍無法解決。
試劑廠家：標準流程下，一抗與二抗的匹配性
建議選擇封閉式平臺
，將兩者繫結；自動化染色劑有助於解決染色的標準化流程問題。但是問題解決時效性差，無法發現內對照染色失敗，不同試劑廠家的質量可能存在質的區別。
質控中心：有助於發現質控問題，但是質控指標有限且時效性差。
病理醫生：可
監控所有指標，解決時效性問題，熟悉各種抗體的表達譜
，但是由於對技術的不熟悉無法提出質控相關的解決方案。
質控是一個系統性工程，需要臨床、技術員、試劑廠家和醫生共同協調，由於涉及專業診斷能力，質控人的選擇建議病理科主任或高年資診斷醫生。
醫脈通
免疫組化質量對於淋巴瘤診斷有著重要作用，能否請您談談切片處理流程中可能出現的問題。
潘華雄教授
從手術室到病理切片呈在病理醫生桌前需要經過手術室、取材間和病理科的脫水及切片染色過程，環環相扣，以上任一環節的失誤都會影響最終切片效果。
醫脈通
病理醫生在免疫組化質控中扮演重要角色，您認為他們的責任是什麼？
潘華雄教授
瞭解技術的病理醫生有利於全流程質控問題的解決，病理醫生的作用在於
透過切片觀察，識別技術環節的問題，聽取技術人員的分析，共同制定解決方案，完成解決方案的驗證及完善。
採訪中潘教授透過7個實際案例的分享，對常見HE切片存在的問題深入剖析其原因，並結合自身多年臨床經驗提出解決方案。（更多實際案例的分享詳見本期採訪影片）
醫脈通
染色強度是決定染色效果的重要因素，能否請您談談什麼是理想的染色強度以及它的決定因素？
潘華雄教授
不同的細胞對於同一抗體會出現不同的染色強度，沒有染色強度就沒有染色層次，理想的染色強度包括棕褐色（黃裡透黑）、膜定位準確完整、細胞核完全覆蓋。決定染色強度的因素如下圖所示，
醫生對於抗體的瞭解程度決定最終的染色效果。
對於修復的時間，建議
水浴的標配時間≥40分鐘，高壓鍋1-4分鐘
（具體需要透過測試得知），
修復液推薦PH值為9.0
。